信息化背景下谈化工检验薄层色谱分离技术|yabo登陆手机版

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yabo登陆手机版-前言  平面色譜法又还包括纸色谱法和薄层色谱法。薄层色谱法是用载板上填充物或工件一薄层物质作为相同相的液相色谱法。应用于最少的是以硅胶为相同相的导电薄层色谱法。

薄层色谱与纸色谱比起,具备分析时间较短、分离出来能力较强,检测灵敏度较高的特点。20世纪60年代以来已代替了部分纸色谱的工作。又由于薄层色谱构建了仪器化,自动化程度提升,测量精度及灵敏度都有相当大提升,至今仍充满活力。

  1 色谱原理  色谱这一概念首先由俄国知名植物学家Tswett明确提出,在研究植物色素构成时找到了色谱分离出来的潜力,首次明确提出了色谱法这一概念。色谱法(chromatography)是一种分离出来并分析简单样品的方法,在化学和生物等领域具有普遍的应用于[1]。它主要利用简单样品本身性质的有所不同,在有所不同相态的展开选择性分配,以流动相和相同相的互相偏移对简单样品中的单一样品展开分类洗刷,简单样品中有所不同的物质不会以有所不同的洗刷速度在有所不同的时间上瓦解相同互为,最后超过分离出来简单样品的效果。

  薄层色谱法具备众多的优点:速度快,可同时进行多个试样;试样预处理非常简单,对试样容许较少;仪器非常简单,操作者便利;分离出来能力较强且灵敏度较高。因此,其用于范围广,用于频率低,已普遍地应用于中药指纹图谱分析、食品添加剂分析、环境科学和化学化工等领域。

  2 色谱技术在生产中的应用于  2.1 精细化工领域  随着色谱分离出来技术研究的不断深入,特别是在集成化和规模化色谱分离出来技术的应用于,使得色谱分离出来技术在精细化工领域应用于更加普遍,特别是在在考古工业生产过程中,色谱分离出来技术尤为重要。在考古工业领域,发酵液成分简单,杂质多样,而目标样品往往含量较低,如何实现目标成分的高效分离出来分析,对于该行业的发展起着关键作用。

  2.2 医药领域  随着医药现代化生产的大大发展,对于医药组分的分离出来与单一成分研究拒绝更加低。但由于药学成分萃取简单,有效成分含量较低等原因,因此必须更加严苛的分离出来分析手段展开药效成分的分离出来和含量测量。目前在医药成分分离出来分析领域主要应用于到的色谱技术主要还包括薄层色谱,气相色谱和毛细管电泳技术。而随着现代分析仪器的大大发展,特别是在中药及天然药物药效成分构成极为简单,对其分离出来拒绝也越发严苛,必须发展更加仪器的色谱技术,如超临界色谱,高效逆流色谱,高效毛细管电泳和色谱-质谱磁共振技术。

  2.3 蛋白质组学研究  色谱技术除了在工业生产中具有普遍的应用于之外,在微观大分子分离出来领域也具有最重要的应用于。例如蛋白质组学研究中,色谱分离出来技术也具有最重要应用于。

目前对于蛋白质组的分离出来研究,主要有双向电泳技术和高效液相色谱技术。其中双向电泳技术根据蛋白质的分子量及等电点在二维领域将蛋白质展开分离出来,可以直观表明生物体内的蛋白质构成,双向电泳融合质谱技术已沦为蛋白质组学研究的一个成熟期的研究平台。

  3 化工检验薄层色谱分离出来技术  将样品溶液点于预先填充物有相同互为(如硅胶)薄层板一端必要的方位,将板置放层析缸中,使点有试样的一端浸泡流动互为(展开剂)中,由于薄层的毛细管起到,展开剂沿薄层慢慢下降,试样的各组分沿着薄层在相同相和流动互为之间大大再次发生沉淀、导电、再行沉淀、再行导电。由于各组分的分配系数有所不同使它们在薄层上移动的距离也有所不同,从而超过分离出来。展开剂下降到一定距离时,从层析缸中放入薄层板。如果组分是有色的,就可以看见各个色斑,如果组分无色,要用物理的或化学的方法染剂,获得一个薄层色谱图。

  3.1 薄层色谱操作方法[2]  薄层色谱的实验步骤有:制板、点样、进行、染剂、定性和定量。  3.2 薄层板的制取  将平板玻璃裁成正方形或长方形,一般分析用20cm×20cm和20cm×10cm两种。将玻璃片洗涤浸泡。

一般来说使用滑法制板,它具备薄层稳固、可批量制取、进行后便于留存、分离出来效果好等优点。  3.3 点样  样品用必要的有机溶剂做成溶液,浓度大约为0.5~2mg/ml。

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点样量为0.5~5ul,在距薄层板底边1cm一处点样,原点直径在3~4mm。手工点样用微量注射器。如用点样仪点样,样量准确、形状规整完全一致,能提升定量分析的准确度。

  3.4 进行  进行的实验操作者是,将点样后的薄层板置放密封的层析槽中,下端浸泡展开剂高度不不应多达0.5cm。进行距离一般为10~15cm,根据溶剂移动的方向分成下行进行和上行进行。

另外,还可利用多次进行、双向进行等方法获得有所不同的层析结果。  3.5 定位与染剂  确认被分离出来组分的方位称作定位。

进行后的薄层板自槽中放入,室温下溶解去溶剂。若被分离出来组分本身有颜色,它们的方位根据有色的斑点才可确认。无色的化合物可使用物理检测法、化学检测法、酶与生物检测法和放射线检测法来定位。

  3.6 定性  试样与标准品同板不作对照试验,二者只f值完全相同且染剂特性完全相同,可可行性指出是同一化合物。适当时使用其他方法加以检验。

  3.7 定量  (1)洗刷法。把组分斑点的吸附剂放入,用溶剂洗刷后,用其他方法测量。如分光光度法、荧光等方法测量。此法操作者简单,效率较低。

  (2)原位法。即在薄层上组分斑点方位展开测量。

又分成目测法、测面积法和薄层扫描仪扫瞄定量法。  4 结束语  综上所述,本文讲解了薄层色谱的操作者流程、薄层色谱扫描仪的工作原理和原油组分的薄层色谱分离出来方法。薄层色谱用作定量分析时,最差使用高效薄层色谱法,即使用分离出来效率高、进行距离较短,灵敏度低的高效薄层板。

且点样、进行、染剂、定量皆用于仪器。高效薄层色谱法的应用于大大提高了薄层分析的再现性和准确度。  参考文献  [1] 孙秀敏,张敏.薄层色谱分离出来技术[J].甘肃科技,2009,25(3):31.  [2] 李凯.薄层色谱方法的改良[J].实验室科学,2008,(1):163-166.刊登请求标明来源。

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